Introducción: La proteína NS3 del virus dengue (VDEN) se considera una diana inmunodominante de células T citotóxicas, mecanismo efector de la respuesta inmune antiviral. En su estructura tridimensional se destaca el dominio helicasa que resulta de gran interés para la evaluación de la capacidad inmunogénica de la proteína NS3 ya que posee el mayor número de epítopes inductores de células T CD4+ y CD8+. Además se ha demostrada que mutaciones puntuales en esta región alteran o inhiben la replicación del virus dengue.

Materiales y Métodos: En este trabajo se realizó el clonaje del fragmento de ADN correspondiente a este dominio en el vector de expresión pQE30 y se evaluó la capacidad de la cepa de Escherichia coli XL1-Blue para expresar este dominio evaluando diferentes condiciones y factores que influyen en su expresión, así como su purificación por cromatografía de afinidad y exclusión molecular. La presencia de la proteína se detectó por SDS-PAGE e Inmunotransferencia.

Resultados: Este estudio logró la mayor expresión del dominio helicasa de la proteína NS3 a una temperatura de 37 °C independientemente de la concentración de IPTG empleada y con un tiempo de inducción de 4 horas. Los medios ricos en sales determinaron el mayor crecimiento celular y la mejor expresión de este dominio en la fracción insoluble tras la ruptura celular por ultrasonido empleando tritón X-100. El dominio helicasa de la proteína NS3 purificado se obtuvo con un alto grado de pureza.

Conclusiones: El presente trabajo describe la obtención optimizada por vía recombinante del dominio helicasa de la proteína NS3 del VDEN 2, el cual pudiera ser una molécula promisoria para el desarrollo de una vacuna contra el VDEN y de drogas antivirales como una terapia alternativa.